Specificities and isotypes of erythrocytes autoantibodies in patients with warm autoimmune hemolytic anemia / Especificidades e isotipos de autoanticuerpos eritrocitarios en pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente

Introduction: Autoimmune hemolytic anemia is a rare disorder characterized by hemolysis mediated by autoantibodies directed against red blood cells. The demonstration of antibody specificity is a very difficult procedure since autoantibodies in general are nonspecific of antigens and react with all erythrocytes analyzed. Occasionally, specificity is observed against the Rh system antigens. Objective: To determinate the specificity of erythrocytes autoantibodies in DAT positive autoimmune hemolytic anemia by MAIEA technique. Methods: The specificity and isotype of erythrocyte autoantibodies were determined in the eluate of 109 blood samples from patients with warm autoimmune hemolytic anemia, by means of the MAIEA technique and the use of monoclonal antibodies that recognized 11 blood group systems and the protein CD47. Results: In 100 percent of cases autoantibodies against Rh system antigens were detected; in 24 cases we detected autoantibodies of IgA and IgM isotypes that recognized different antigens that were recognized by IgG isotype autoantibodies. For idiopathic and secondary warm autoimmune hemolytic anemias, predominance was observed against three or more specificities. IgG was detected in 99.09 percent of the eluates, IgA in 35.77 percent and IgM in 16.51 percent. The high degree of hemolysis was related to the presence of several isotype autoantibodies against four or more blood group specificities. Conclusions: The MAIEA technique is a sensitive method that can be used to determine the specificities and isotypes of autoantibodies in patients with warm autoimmune hemolytic anemia.

Introducción: La anemia hemolítica autoinmune es un trastorno poco común, caracterizado por hemólisis mediada por autoanticuerpos dirigidos contra los glóbulos rojos. La demostración de la especificidad de los anticuerpos es un procedimiento muy difícil, ya que los autoanticuerpos en general no son específicos de los antígenos y reaccionan con todos los eritrocitos analizados. Ocasionalmente, se observa especificidad contra los antígenos del sistema Rh. Objetivo: Determinar la especificidad de los autoanticuerpos eritrocitarios en pacientes con anemias hemolíticas autoinmunes PAD positivas con el empleo de la técnica MAIEA Métodos: Se determinó la especificidad e isotipo de los autoanticuerpos eritrocitarios en el eluido de 109 muestras de sangre de pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente, mediante la técnica de MAIEA y el uso de anticuerpos monoclonales que reconocieron 11 sistemas de grupos sanguíneos y la proteína CD47. Resultados: En el ciento por ciento de los casos se detectaron autoanticuerpos contra los antígenos del sistema Rh. En 24 casos se descubrió autoanticuerpos de isotipos IgA e IgM que reconocieron diferentes antígenos que fueron a su vez reconocidos por autoanticuerpos de isotipo IgG. Se observó para las anemias hemolíticas autoinmunes calientes idiopáticas y secundarias; predominio frente a tres o más especificidades. Se detectó IgG en el 99,09 por ciento de los eluidos, IgA en 35,77 por ciento e IgM en 16,51 por ciento. El alto grado de hemólisis se relacionó con la presencia de varios isotipos de autoanticuerpos contra cuatro o más especificidades de grupos sanguíneos. Conclusiones: La técnica MAIEA es un método sensible que puede usarse para determinar las especificidades e isotipos de autoanticuerpos en pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente.

Imunohematologia veterinária: antígenos eritrocitários caninos / Veterinary immunohematology: canine erythrocyte antigen / Inmunohematología veterinaria: antígenos eritrocitarios caninos

A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)

Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)

La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)

Frequência dos antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos no estado da Paraíba / Frequency of AB blood System in domestic cats of Paraíba, Brazil

Objetivou-se com este estudo determinar a frequência de antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos da Paraíba, Brasil. Foram selecionados aleatoriamente 178 gatos, clinicamente saudáveis, sem pré-requisitos quanto a sexo ou raça, com peso corporal acima de 1,5 kg e faixa etária acima de um ano de idade, abordados no ato da consulta ambulatorial em clínicas médicas de pequenos animais distribuídas entre três cidades da Paraíba (João Pessoa, Campina Grande e Patos). A determinação dos tipos sanguíneos foi realizada através do teste de hemaglutinação em tubo de ensaio e, a tipagem reversa foi realizada para as amostras tipos B e AB para confirmação e evidenciação de aloanticorpos naturais. Neste estudo a frequência relativa de antígenos eritrocitários A, B e AB em sua totalidade para felinos sem raça foram 98,1%, 1,21% e 0,69%, respectivamente. Todos os felinos com definição racial foram do tipo sanguíneo A. Diante destes, a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias obtidas foi de 2,78%, sendo cerca 40% (1,11%) potencialmente fatais. Desta forma, dado o conhecimento da frequência dos diferentes tipos sanguíneos em felinos, de uma determinada região, conclui-se que a tipagem sanguínea e o teste de compatibilidade, são importantes ferramentas que permitem ao médico veterinário tomar medidas preventivas que minimizem riscos de ocorrência de reações transfusionais e isoeletrólise neonatal e, estabelece pré-requisitos a respeito dos riscos de procedimentos hemoterápicos em felinos que circunstancialmente necessitem serem conduzidos de forma aleatória.

The objective of this study was to determine the frequency of the AB blood group antigens system in domestic cats of Paraíba, Brazil. We randomly selected 178 cats which were clinically healthy, with no prerequisites in terms of gender or race, weighing above 1.5 kg, and were over one year of age. These cats were randomly selected when they entered the small animal clinic facilities in the cities of João Pessoa, Campina Grande and Patos. The determination of blood types was made using the hemagglutination test tube, and the reverse typing was performed for samples B and AB types and for confirmation of alloantibodies natural disclosure. In this study the relative frequency of A, B and AB blood group antigens in cats without a determined breed was 98.1%, 1.21% and 0.69% respectively. All cats with breed definition were blood type A. The likelihood of random transfusion reactions was 2.78%, approximately 40% (1.11%) potentially fatal. Thus, given knowledge of the frequency of different blood types in cats, from a given region, it is concluded that blood typing and compatibility test are important tools that enable the veterinarian to take preventative measures to minimize risks of isoelectrolisys reactions and neonatal transfusion, and establishes prerequisites about the risks of hemotherapic procedures in cats that require circumstantially to be conducted randomly.

Screening and Identification of Unexpected Red Cell Antibodies by Simultaneous LISS/Coombs and NaCl/Enzyme Gel Methods

We evaluated the clinical usefulness of simultaneous LISS/Coombs and NaCl/Enzyme testing using the gel method for screening and identification of unexpected antibodies in 15,014 samples. When unexpected antibodies were detected by either screening test, those antibodies were identified using both the LISS/Coombs and the NaCl/Enzyme gel test. The positive screening rates of the LISS/Coombs, NaCl/Enzyme, and combined tests (excluding 25 autoantibody cases) were 0.48%, 1.29%, and 1.39%, respectively. Among the 57 samples positive by both screening methods, the antibodies in 19.3% could be identified only by the NaCl/Enzyme method. Among the 137 samples positive only by NaCl/Enzyme screening, 74.5% showed positive results in antibody identification only by the NaCl/Enzyme test, although 7.3% were also positive in the LISS/Coombs test. The NaCl/Enzyme method thus showed about threefold higher detection rates than the LISS/Coombs method, especially in screening for Rh antibodies, and higher exact identification rates and discriminatory power for identifying mixed antibodies. Addition of the NaCl/Enzyme method to routine laboratory procedures may detect and identify considerable numbers of significant antibodies that might be missed if only the LISS/Coombs method is used.